收样指南汇总3.0
Blood
03 \ 血液收集指南
血浆
一、基因组
1. 甲基化测序(RRBS、BSAS）
1.1. 采集外周血，迅速转入 EDTA 或枸橼酸钠抗凝管中，涡旋或用移液器 Tip 混匀；
1.2. 在 1 小时（室温条件下）或 2 小时(4℃条件下)内进行以下操作：4℃，820g离心
10 分钟；
1.3. 吸取上清转至洁净的离心管中，16,000g, 4℃,离心 10 分钟，小心吸取上清到冻存
管中（≥ 2 mL/sample）；
1.4. 液氮速冻后放入-80℃冰箱中保存。
2. 全基因组测序
2.1. 采集外周血，迅速转入 EDTA 或枸橼酸钠抗凝管中，涡旋或用移液器 Tip 混匀；
2.2. 在 1 小时（室温条件下）或 2 小时(4℃条件下)内进行以下操作：4℃，820g 离心
10 分钟；
2.3. 吸取上清转至洁净的离心管中，16,000g, 4℃,离心 10 分钟，小心吸取上清到冻存
管中（≥ 2 mL/sample）；
2.4. 液氮速冻后放入-80℃冰箱中保存。
3. 全外显子组测序
3.1. 采集外周血，迅速转入 EDTA 或枸橼酸钠抗凝管中，涡旋或用移液器 Tip 混匀；
3.2. 在 1 小时（室温条件下）或 2 小时(4℃条件下)内进行以下操作：4℃，820g 离心
10 分钟；
3.3. 吸取上清转至洁净的离心管中，16,000g, 4℃,离心 10 分钟，小心吸取上清到冻存
管中（≥ 2 mL/sample）；
3.4. 液氮速冻后放入-80℃冰箱中保存。
二、转录组
1. 采集外周血，迅速转入 EDTA 抗凝管中，涡旋或用移液器 Tip 混匀；
2. 在 1 小时（室温条件下）或 2 小时(4℃条件下)内进行以下操作：4℃，820g 离心 10
分钟；
3. 吸取上清转至洁净的离心管中，16,000g, 4℃,离心 10 分钟，小心吸取上清到冻存管
中；
4. 液氮速冻后放入-80℃冰箱中保存。
三、蛋白组
1. TMT
1.1. 采集外周血，迅速转入抗凝管中，涡旋或用移液器 Tip 混匀；
1.2. 在 1 小时（室温条件下）或 2 小时(4℃条件下)内进行以下操作：4℃，820g 离心
10分钟；
1.3. 吸取上清转至洁净的离心管中，16,000g, 4℃,离心 10 分钟，小心吸取上清到冻存
管中（0.1-1ml/sample）；
1.4. 液氮速冻后放入-80℃冰箱中保存。
2. Label free
2.1. 采集外周血，迅速转入抗凝管中，涡旋或用移液器 Tip 混匀；
2.2. 在 1 小时（室温条件下）或 2 小时(4℃条件下)内进行以下操作：4℃，820g 离心
10 分钟；
2.3. 吸取上清转至洁净的离心管中，16,000g, 4℃,离心10分钟，小心吸取上清到冻存
管中（50-500ul/sample）；
2.4. 液氮速冻后放入-80℃冰箱中保存。
3. 磷酸化蛋白组学
3.1. 采集外周血，迅速转入抗凝管中，涡旋或用移液器 Tip 混匀；
3.2. 在 1 小时（室温条件下）或 2 小时(4℃条件下)内进行以下操作：4℃，820g 离心
10 分钟；
3.3. 吸取上清转至洁净的离心管中，16,000g, 4℃,离心 10 分钟，小心吸取上清到冻存
管中（0.2-2ml/sample）；
3.4. 液氮速冻后放入-80℃冰箱中保存。
4. 糖基化蛋白组学
4.1. 采集外周血，迅速转入抗凝管中，涡旋或用移液器 Tip 混匀；
4.2. 在 1 小时（室温条件下）或 2 小时(4℃条件下)内进行以下操作：4℃，820g 离心
10 分钟；
4.3. 吸取上清转至洁净的离心管中，16,000g, 4℃,离心 10 分钟，小心吸取上清到冻存
管中（0.5-5ml/sample）；
4.4. 液氮速冻后放入-80℃冰箱中保存。
四、代谢组
1. 使用肝素钠抗凝管采集全血，并尽快进行血浆分离；
2. 1300g 室温离心 10 分钟；
3. 取上层至冻存管中，液氮速冻后-80℃冰箱保存（ NMR 实验 500ul/sample，GC-MS，
LC-MS 实验 200ul/sample）；
提示点：
1）代谢组学实验检测推荐使用肝素钠抗凝管，柠檬酸是 TCA 循环中的重要物质，
使用柠檬酸钠抗凝剂的话会引入外源污染。而 EDTA 会影响 NMR 采谱。但肝素钠会
对 RNA 相关实验有负面作用，主要是因为会抑制反转录酶活性。请根据自身具体情
况选用合适的抗凝管；
2）血浆参考产率：≈ 50%（例如：1mL 全血大约能得 0.5mL 血浆）。
五、蛋白芯片
样品量要求：200ul/sample。注意：一定避免反复冻融。
样本收集步骤：
应使用EDTA抗凝管采集全血，并尽快进行血浆分离：3000rpm室温离心10分钟，取上层，0.2mL/管分装至1.5mL离心管中。-80度冻存。足量干冰寄送。
注意事项：
1）血浆参考产率：≈50%（例如：1mL全血大约能得0.5mL血浆）